Astrowirusy jako przyczyna zapalenia żołądka i jelit u dzieci ad

W pierwszym badaniu, w latach 1985-1986, stolce uzyskano od 1111 dzieci z zapaleniem żołądka i jelit oraz od 947 dzieci w podobnym wieku, które odwiedzały klinikę z innych powodów. Osiemdziesiąt cztery procent tych okazów pochodziło od dzieci w wieku poniżej dwóch lat, a 55 procent pochodziło od dzieci w wieku poniżej jednego roku życia. W drugim badaniu, w 1989 r., Stolce uzyskano od 580 pacjentów w wieku poniżej sześciu miesięcy, u których wystąpiło zapalenie żołądka i jelit oraz od 512 dopasowanych wiekowo dzieci, które nie ukończyły tego badania. Większość pacjentów z zapaleniem żołądka i jelit można było dopasować do wieku z grupą kontrolną, ale dla niektórych próbki kontrolne nie były dostępne. Szczegóły dotyczące charakterystyki epidemiologicznej i projektu tych badań zostały opisane w innym miejscu.22 Stołki od wszystkich dzieci zostały przebadane pod kątem pasożytów cryptosporidium i jelitowych oraz patogenów bakteryjnych, w tym gatunków salmonelli, gatunków Shigella, enteroinwazyjnych, enteropatogennych, enterohemoraminalnych i enterotoksycznych Escherichia coli, Campylobacter jejuni, Plesiomonas shigelloides i gatunki vibrio, poprzednio opisanymi metodami. 23 Kału zamrożono i przechowywano w -70 ° C do późniejszych testów wirusowych. Testy wirusologiczne
Wszystkie próbki kału testowano jako 10% (wag./obj.) Zawiesin w 0,01 M buforze fosforanowym (pH 7,0) dla astrowirusów, antygenu grupy adenowirusowej, adenowirusów jelitowych (Ad40 i Ad41) i rotawirusów grupy A przez enzymy oparte na przeciwciałach monoklonalnych testy immunologiczne. Wcześniej ustaliliśmy z próbkami klinicznymi, że wszystkie testy były porównywalne z mikroskopią elektronową pod względem czułości i swoistości.21, 24, 25 W celu wykrycia astrovirusów stosowaliśmy test pośredniego podwójnego przeciwciała, z przeciwciałem monoklonalnym jako przeciwciałem wychwytującym i króliczą surowicę odpornościową jako przeciwciało wykrywające.21 Surowicę odpornościową przygotowano przeciwko astrowirusowi typu 2, ale jest grupą reaktywną w teście immunoenzymatycznym.21. Testy immunoenzymatyczne dla rodzajów adenowirusów jelitowych przeprowadzono za pomocą mieszaniny przeciwciał monoklonalnych dla każdego typu. antygenu grupy adenowirusowej, przeciwciało monoklonalne przeciwko antygenowi grupy heksonowej adenowirusa, 26 uzyskane z American Type Culture Collection (Rockville, MD), zastąpiono w teście mieszaniną Ad40 i Ad41 przeciwciał monoklonalnych.24 Test wykrywania z grupy A rotawirusa 25 zastosowano przeciwciało monoklonalne przeciwko antygenowi rotawirusowemu VP6.27 Substratem dla peroksydazy była 0-fenylenodiamina i woda nadtlenek genów (Abbott Laboratories, North Chicago), a reakcje zatrzymano N kwasem siarkowym. Absorbancję roztworów zmierzono przy długości fali 490 nm w spektrofotometrze z czytnikiem płytek. Próbki uznawano za pozytywne dla wirusów, jeśli wartość absorbancji była większa niż 0,1 i ponad trzy razy większa niż w przypadku kontroli ujemnej (rozcieńczalnik kału lub ujemna próbka kału w soli fizjologicznej buforowanej fosforanem).
Analiza statystyczna
Dla porównania statusu choroby ze statusem wirusowego wydalania, podsumowanym w tabelach po drugiej , użyto dokładnego testu Fishera do oceny poziomu istotności. Test chi-kwadrat i test t-Studenta wykorzystano do sprawdzenia różnych porównań. Wszystkie testy były dwustronne. Przetestowaliśmy także pod kątem zestawów wirusów, bakterii i pasożytów, które odróżniały pacjentów z zapaleniem żołądka i jelit od tych, które nie miały zastosowania metody wieloczynnikowej, krokowej regresji logistycznej
[podobne: kardiolog dziecięcy warszawa nfz, przywileje honorowego dawcy krwi, usunięcie zaćmy cena ]